• lab-217043_1280

Metoda uklanjanja ostataka ćelija

Postoji mnogo ćelijskih fragmenata nakon mehaničke lize ćelijske suspenzije.Kako ukloniti ove fragmente?Pogledajmo različite pristupe:

1. Koristite metodu razblaživanja.Kada se ćelije razblaže, one se takođe mogu razmnožavati, postajaće sve brojnije, a ćelijskih ostataka će, shodno tome, biti sve manje i manje.
2. Postoji i prirodno naselje.Ćelije se talože brže od većine fragmenata: : Premjestite ćelijsku suspenziju ucentrifugalna cijev, a kada većina ćelija potone, gornji rastvor se može usisati, a zatim dodati u rastvor kulture da suspenduje ćelije.Ova metoda se može koristiti više puta, dok svaki put možete pod mikroskopom promatrati da li ispunjava vaše zahtjeve.
3. Centrifuga male brzinemože ukloniti ostatke, općenito 700g, 5min
4. Prilikom centrifugiranja, pod uslovom da je broj ćelija dovoljan, smanjite vreme centrifugiranja, kao što je 5 min, 1000 obrtaja u minuti, umesto 3 min, 1000 obrtaja u minuti, i uklonite supernatant, jer su nekroza i ostaci generalno u supernatantu!Ovu operaciju treba izvršiti samo jednom tokom procesa pranja prije inkubacije!

Iako postoji mnogo načina za uklanjanje ostataka ćelija, otkrit ćete da je centrifugiranje jedna od najefikasnijih metoda!

450

A budući da biljna tkiva i ćelije imaju ćelijske zidove koji se sastoje od celuloze, hemiceluloze i pektina, općenito je potrebno samljeti kvarcni pijesak ili stakleni prah odgovarajućim rastvorom za ekstrakciju ili tretirati celulazom da bi se postigla svrha.Fragmentacija bakterijskih ćelija je teža, jer je cijeli skelet bakterijske ćelijske stijenke zapravo kovalentna veza cističnih makromolekula peptidoglikana, vrlo čvrsta.Uobičajene metode razbijanja bakterijskih staničnih zidova uključuju ultrazvučno drobljenje, mljevenje pijeska, ekstruziju pod visokim pritiskom ili tretman lizozimom.Nakon što se tkivo i ćelije razbiju, odabire se odgovarajući pufer za ekstrakciju željenog proteina.Nerastvorljivi materijali kao što su fragmenti ćelija se uklanjajucentrifugaili filtracijom.

kontaktirajte Whatsapp & Wechat: +86 180 8048 1709


Vrijeme objave: Jul-24-2023