Kada koristimo neki potrošni materijal za ćelijsku kulturu, uvijek se susrećemo s problemom prolaska stanica.Danas ćemo ukratko podijeliti s vama kako koristiti visokoefikasne tikvice za protresanje za prolaz ćelija.Kada koristimo visokoefikasne tikvice za mućkanje(https://www.luoron.com/3l5l-high-efficiency-erlenmeyer-flask-product/) za prolaz ćelije, postoje dvije metode koje možete izabrati, kao što je sakupljanje ćelija centrifugiranjem, a zatim propuštanje, ili direktno prolaz.

Metoda centrifugalnog prolaza:

(1) Prenesite ćelije uvisokoefikasna boca za mućkanje zajedno sa podlogom za kulturu u epruvetu za centrifugiranje za centrifugiranje.

(2) Odbacite supernatant, dodajte novu podlogu za kulturu centrifugalna cijev ipipetada se formira suspenzija ćelija.

(3) Prebrojite i inokulirajte u nove tikvice za kulturu.

Ako se usvoji direktan prolaz, ostavite suspendirane ćelije da se polako slegnu na dno visokoefikasne tikvice za mućkanje, isisajte 1/2~2/3 supernatanta, a zatim pipetirajte kako biste formirali ćelijsku suspenziju prije prolaza.

Ono na šta treba da obratimo pažnju tokom operacije je da tripsin treba da bude prethodno zagrejan, a temperatura je oko 37°C.Brzina centrifugiranja treba da bude odgovarajuća.Ako je brzina preniska, ćelije se ne mogu efikasno odvojiti.Ako je brzina centrifugiranja previsoka, a vrijeme predugo, stanice će biti stisnute, uzrokujući oštećenje ili čak smrt.Ćelije treba redovno nadgledati, a ako se otkrije kontaminacija, treba je na vrijeme riješiti.